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 細(xì)胞毒活性測(cè)定法
很多細(xì)胞因子針對(duì)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞及病毒感染的細(xì)胞具有溶細(xì)胞或抑制細(xì)胞生長的活性。常用的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法有3H-TdR摻人法、比色法、染色法和直接計(jì)數(shù)法等。檢測(cè)細(xì)胞因子促生長活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測(cè)樣品或細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品與培養(yǎng)的細(xì)胞株共同培養(yǎng)一定時(shí)間，然后檢測(cè)增殖的細(xì)胞數(shù)。此外，測(cè)定代謝產(chǎn)物熒光強(qiáng)度的方法也可檢測(cè)增殖細(xì)胞數(shù)，如ATP法和cAMP法。檢測(cè)細(xì)胞因子溶細(xì)胞八田胞毒活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測(cè)樣品或細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品與培養(yǎng)的細(xì)胞株共同培養(yǎng)一定時(shí)間，然后檢測(cè)存活的靶細(xì)胞數(shù)，并與對(duì)照比較求得溶細(xì)胞或抑制細(xì)胞生長的百分率，或以O(shè)D值對(duì)樣品稀釋度作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)品的劑量反應(yīng)曲線，從曲線上求得相應(yīng)的待測(cè)樣品的含量。生物學(xué)活性檢測(cè)法所用的靶細(xì)胞可直接從組織中分離，如骨髓細(xì)胞的集落形成試驗(yàn)和胸腺細(xì)胞（脾細(xì)胞）的增殖試驗(yàn)，或用體外培養(yǎng)的依賴細(xì)胞因子才能生長的細(xì)胞因子依賴株及對(duì)細(xì)胞因子殺傷敏感的細(xì)胞作為靶細(xì)胞。細(xì)胞因子還能誘導(dǎo)靶細(xì)胞表達(dá)某些表面分子或分泌一些蛋白質(zhì)，可以用熒光素標(biāo)記抗體檢測(cè)表達(dá)相應(yīng)分子的細(xì)胞數(shù)，或用特定方法測(cè)定細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)，間接了解細(xì)胞因子的活性。其測(cè)定方法可分為促進(jìn)細(xì)胞增殖和增殖抑制法、抗病毒活性測(cè)定法、集落形成法、趨化作用測(cè)定法及細(xì)胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)物測(cè)定法等。前者的增殖細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞因子的含量成正比，而后者的增殖細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞因子的含量成反比。其原理是根據(jù)細(xì)胞因子特定的生物學(xué)活性，應(yīng)用相應(yīng)的指示系統(tǒng)，如各種依賴性細(xì)胞株或靶細(xì)胞，同時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比測(cè)定，從而得知樣品中細(xì)胞因子的活性水平，一般以活性單位（U／mL）表示。
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