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elisa試劑盒白介素類檢測可溶性蛋白的含量
更新時間:2018-04-13   點擊次數(shù):1146次

elisa試劑盒白介素類實驗成功的前提是樣本的正確處理加上實驗途中正確的操作,正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準(zhǔn)確性的*步。通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準(zhǔn)確性的*步,下面就簡單介紹一下不同類型的樣本的處理方法。

1、  血清

血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。

用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃放置一晚,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

采血過程中應(yīng)避免溶血,因為紅細(xì)胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測的不準(zhǔn)確性。同時也應(yīng)避免細(xì)菌污染,因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測的假陽性。

2、  血漿

用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測時還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
總的來說,因為elisa試劑盒白介素類只能檢測可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)保證所有樣本均為澄清的液體,沉淀或懸浮物都應(yīng)離心去除。
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