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ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠實驗條件的選擇很重要
更新時間:2018-04-09   點擊次數(shù):1142次

ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠試驗時,注意事項如下:

1.正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4)ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
Chlorzoxazone    350mg    氯唑沙宗標(biāo)準(zhǔn)品    95-25-0
Cholecalciferol (Vitamin D3)    30mg×mpules    維生素D3標(biāo)準(zhǔn)品    67-97-0
Cholesteryl Caprylate    200mg    膽固醇辛酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    1182-42-9
Cholestyramine Resin    500mg    考來烯胺樹脂標(biāo)準(zhǔn)品    11041-12-6
Cholic Acid (AS)    2g    膽酸標(biāo)準(zhǔn)品    81-25-4
Choline Bitartrate    200mg    重酒石酸膽堿標(biāo)準(zhǔn)品    87-67-2
Choline Chloride    200mg    氯化膽堿標(biāo)準(zhǔn)品    67-48-1
Chromium Picolinate    100mg    吡啶甲酸鉻標(biāo)準(zhǔn)品    
Ciclopirox    50mg    環(huán)吡酮標(biāo)準(zhǔn)品    29342-05-0
Ciclopirox Olamine    125mg    環(huán)砒酮胺標(biāo)準(zhǔn)品    41621-49-2
ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠

 

 

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